Kjemi 2 · Forsøk 1 av 13 · Analyse

Tynnsjiktkromatografi av bladpigmenter

Brukt på eksamen. Forsøket er brukt i Udirs eksamensoppgaver eller sensorveiledninger.

Bare i skolelaboratorium. Dette forsøket skal bare gjøres i skolens laboratorium under oppsyn av lærer. Ikke prøv det hjemme. Følg sikkerhetsinstruksjonene i HMS-delen. (Bruker meget brannfarlige løsemidler (heptan og aceton) som skal håndteres i avtrekkskap.)

1. Hensikt og teori

R_f

\displaystyle \displaystyle R_f = \frac{\text{avstanden fra startlinja til midten av flekken}}{\text{avstanden fra startlinja til løpemiddelfronten}}

Laster...

Alle forsøk Syntese av acetylsalisylsyre med utbytte og renhet

Tynnsjiktkromatografi av bladpigmenter

Brukt på eksamen. Forsøket er brukt i Udirs eksamensoppgaver eller sensorveiledninger.

1. Hensikt og teori

Separere fargestoffene i et bladekstrakt med tynnsjiktkromatografi (TLC), beregne retardasjonsfaktoren $R_f$ for hver flekk og forklare rekkefølgen ut fra polariteten til stoffene og fasene.

I kromatografi fordeler stoffene seg mellom en stasjonær fase som står stille, og en mobil fase som beveger seg. Her er den stasjonære fasen silika (SiO₂ med OH-grupper på overflaten). Den er polar og kan danne hydrogenbindinger og dipol–dipol-bindinger til stoffene. Den mobile fasen er en blanding av heptan og aceton (7 : 3), som er overveiende upolar.

Et stoff som binder seg svakt til silika og løser seg godt i løpemiddelet, følger løpemiddelet langt opp på plata. Et stoff som binder seg sterkt til silika, blir liggende nær startlinja. Karotener består bare av C og H og er nesten helt upolare, så de vandrer lengst. Xantofyller har OH-grupper og vandrer kortest. Klorofyll b har en aldehydgruppe (–CHO) der klorofyll a har en metylgruppe, og er derfor litt mer polart enn klorofyll a.

Hvor langt et stoff har vandret, oppgis som retardasjonsfaktoren:

\displaystyle \displaystyle R_f = \frac{\text{avstanden fra startlinja til midten av flekken}}{\text{avstanden fra startlinja til løpemiddelfronten}}

R_f

ligger alltid mellom 0 og 1. Verdien avhenger av den stasjonære fasen, løpemiddelet og temperaturen, og av om kammeret er mettet med damp. Derfor sammenligner vi bare

R_f

-verdier fra samme plate, eller fra plater som er kjørt under nøyaktig like forhold. Byttes fasene om (upolar stasjonær fase og polar mobil fase), snus rekkefølgen. I gasskromatografi er prinsippet det samme, men der måles retensjonstiden: stoffet som binder svakest til den stasjonære fasen (og har lavest kokepunkt), kommer først ut.